一:安全試劑盒的用途:
1、ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
2、在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。
3、再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
4、加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
5、由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。
二:安全試劑盒的原理:
1、將特定抗體(一抗)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫性。一抗是待測(cè)抗體的抗體,識(shí)別待測(cè)抗體。
2、二抗是一種與酶偶聯(lián)的抗體,既保留了其免疫活性,又保留了酶的活性。二抗識(shí)別并結(jié)合待測(cè)抗體。
3、測(cè)定時(shí),固定的一抗先與樣品稀釋液反應(yīng),將樣品中待測(cè)抗體固定;洗滌后再與二抗反應(yīng)。每一步之間都要進(jìn)行洗滌。
4、加入底物,酶作用底物,使之變色。底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物。
5、產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺有無(wú)定性或定量分析。